Le Kit ISOLATE II RNA Micro est spécialement conçu pour isoler rapidement et efficacement l'ARN totale extrêmement pure des très petits échantillons. Les échantillons types comprennent de petits nombres de cellules (jusqu'à 5 x 105) et de tissus (jusqu'à 5 mg) tels que des cellules capturées au laser, des cryosections microdissectées, des aspirations d'aiguilles fines, des échantillons de biopsie, des granulés de cellules de culture et des cellules triées par cytomètre en flux. Le protocole est facile à suivre pas à pas. Les cellules sont lysées avec un tampon de lysis optimisé contenant des ions chaotropiques, qui inactive simultanément les RNases, empêchant ainsi la dégradation de l'ARN libérée. Le lysate est ensuite appliqué à une colonne de spin pour retirer de manière sélective l'ADN génomique (L'ADN sans RNase I est fourni avec le kit). Il n'est pas nécessaire d'effectuer une étape de digestion de DNase I séparée. L'ARN est ensuite liée à la membrane de silice. Le nouveau design permet l'élution de l'ARN en seulement 5 30 l–.µ Les étapes de lavage simples éliminent les débris cellulaires restants. L'ARN Pure et hautement concentrée est élucidée lors de la dernière étape avec de l'eau sans RNase. L'ARN porteuse RNA - poly (- A) est incluse dans le kit, qui n'interfère généralement pas avec la RT - PCR ultérieure, MAIS permet une performance optimale avec les plus petits échantillons. Le manuel du produit en ligne contient des protocoles pour purifier l'ARN totale à partir de cryosections microdissectées, de cellules capturées au laser et de cellules de culture, purifiant l'ARN totale à partir des tissus, le traitement DNase I de l'ARN purifiée dans la solution et le nettoyage et la concentration de l'ARN à partir de mélanges de réaction. L'ARN isolée affiche d'excellentes performances dans des applications en aval telles que la transcription inverse, l'extension de l'amorce, le PCR en temps réel, l'analyse des blots du Nord, les microréseaux et les essais de protection de l'ARN.

Caractéristiques

Protocole rapide: 40 min/12 preps

Parfait pour les petits échantillons: biopsie ou cellules simples

Rendement et pureté élevés (A260 / A280 ratio 1,9 - 2.1)

Excellente récupération et intégrité de l'ARN (RIN > 9 )

Filtres supplémentaires (broyeurs) et DNase I inclus

Applications

Isolation de l'ARN par rapport à de petites quantités d'échantillons : cellules simples, granulés de cellules de culture, matériaux de biopsie, Cryosections, cellules capturées au Laser, petites quantités de tissus, cellules triées en flux

L'ARN isolée est prête pour des applications en aval telles que la transcription inverse et le PCR en temps réel

Composants: Filtres d'isolation II, Micro-colonnes d'RNA d'isolation II, Tubes de collecte, tampon de lavage de la râpe tampon, tampon de lavage RW1, tampon de détartrage de Membrane RW2, tampon de réaction MEM pour DNase I, RDN DNase I, support sans RNase (lyophilisé) Agent de réduction d'ARN, TCEP, eau sans RNase

Conditions de stockage: le contenu du Kit ISOLATE II RNA Micro doit être stocké sec à température ambiante. Dans ces conditions, le kit est stable pendant 12 mois.