L'analyse des rapts est une technique permettant de détecter rapidement les polymorphismes génomiques. Un simple apprêt teur oligonucléotidique court de séquence arbitraire est utilisé dans des conditions de faible rigueur en PCR pour générer une gamme reproductible de produits spécifiques à la souche.

Pour effectuer des expériences de profilage d'ADN en utilisant la technique de l'ADN polymorphe randomement amplifié [RAPD (1)] .

Les perles de réaction à dosage unique préformulées et prédistribuées sont fournies sous forme de perles à température ambiante stable afin d'assurer une meilleure reproductibilité entre les réactions, minimiser les étapes de piégeage et réduire le risque d'erreurs de piégeage et de contamination.

RAPD * les réactions sont simples à effectuer : il suffit d'ajouter une solution d'ADN génomique et un apprêt à un tube de perles d'analyse de RAPD à un volume de réaction final de 25 l et de faire leµcycle de la réaction.

Chaque lot de perles d'analyse de RAPDS est testé de manière fonctionnelle pour garantir sa capacité à générer un motif de bande différentielle entre les deux contrôles. Par exemple, les souches coli à l'aide de l'apprêt d'analyse de RAPD 2 inclus avec les perles de RAPD.

Les réactions au rapt sont pré - optimisées pour une utilisation avec une grande variété d'organismes.

Les perles d'analyse de rapds prêtes à l'emploi sont conçues comme des réactions prédéfinies et prédispensées pour effectuer une analyse d'ADN polymorphe amplifiée aléatoire (RAPD). Avec l'analyse des rapts, les polymorphismes génomiques peuvent être détectés à plusieurs loci en utilisant uniquement des quantités de nanogrammes d'ADN. Les réactions au rapt sont fournies sous forme de perles séchées stables à température ambiante qui contiennent tous les réactifs nécessaires, à l'exception de l'apprêt, pour effectuer une analyse du rapt.

L'analyse des rapts est une technique permettant de détecter rapidement les polymorphismes génomiques. Un simple apprêt teur oligonucléotidique court de séquence arbitraire est utilisé dans des conditions de faible rigueur en PCR pour générer une gamme reproductible de produits spécifiques à la contrainte qui sont analysés par électrophorèse en gel. Dans ces conditions, les polymorphismes génomiques peuvent être détectés à divers loci en utilisant uniquement des quantités de nanogrammes d'ADN. L'analyse des rapts a été utilisée dans de nombreuses applications, notamment la cartographie génétique, la détection de la diversité des tensions, l' analyse démographique, l' épidémiologie et l'analyse des relations phylogénétiques et taxonomiques (2).

Les réactions au rapt sont fournies sous forme de perles séchées qui contiennent tous les composants PCR nécessaires, à l'exception de l'apprêt, à des concentrations optimisées pour l'analyse des rapds. Les perles sont fournies dans des tubes à paroi fine de 0,5 mL compatibles avec la plupart des cyclistes thermiques. Chaque lot de perles d'analyse de rapds prêtes à l'emploi contient suffisamment de réactifs pour 100 réactions de rapds individuels : perles d'analyse de rapds, contrôle E. coli DNA BL21, contrôle E. coli L'ADN C1a, l'apprêt d'analyse des rapts 2 et le livret d'instruction (ADN de deux E. coli strains and RAPD analysis primer 2 sont fournis comme contrôles pour évaluer la capacité des perles de COLLE à amplifier l'ADN et à identifier les polymorphismes).

Le Kit d'analyse de RAPD comprend des perles d'analyse de rapds prêtes à l'emploi et six apprêts qui peuvent être utilisés avec des perles d'analyse de RAPD. Chaque apprêt de l'ensemble est un 10 - mer arbitraire spécialement conçu pour une utilisation dans l'analyse des rapts. Les apprêts sont livrés lyophilisés et peuvent être reconstitués avec 500 L d'eau distillée stérileµpour donner une concentration finale de 5 pmol/ l.µ

Références

1. Williams, J. g. et al. Nucl. Acides, rés. 18, 6531 (1990). 2. Welsh, J. et al. PCR 2: A Practical Approach, McPherson, M. J., Hames. B. d. et Taylor, g. r., éd., chap. 11, IRL Press (1995).

Les perles de réaction à dosage unique sont fournies sous forme de perles stables à température ambiante pour assurer une meilleure reproductibilité entre les réactions, minimiser les étapes de piégeage et réduire le risque d'erreurs de piégeage et de contamination

RAPD * les réactions sont simples à effectuer Ajoutez—simplement une solution d'ADN génomique et un apprêt à un tube de perles d'analyse de RAPD à un volume de réaction final de 25 l et pédalez la réaction µ

Les réactions au rapt sont pré - optimisées pour une utilisation avec une grande variété d'organismes