Ce milieu peut être utilisé comme méthode de criblage pour la différenciation d'Enterobacteriaceae en fonction de la capacité de certaines espèces à utiliser le citrate comme source unique de carbone. Il est souvent utilisé comme test de dépistage pour Klebsiella pneumoniae (réaction Positive) tandis que l'Escherichia coli est négatif. D'autres utilisations incluaient la distinction entre les espèces de Salmonellae positive citrate (par exemple Salmonella enteritidis) et celles qui sont négatives (par exemple Salmonella typhi et Salmonella paratyphi a). Le milieu est inoculé en grattant l'organisme (en pure culture )dans le milieu. Un résultat positif produit un changement de couleur du vert au bleu vif et une réaction négative laisse la couleur inchangée.